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产品简介:
1. Cytomix缓冲液(细胞转染)产品组成:120 mmol/L KCl, 0.15 mmol /L CaCl210 mmol /L K2HPO4,pH 7.6,25 mmol /L HEPES,pH7.6,2 mmol /L EGTA, pH 7.6,5 mmol /L MgCl2,2 mmol /L ATP,5 mmol /L谷胱甘肽。
2. 参考电击参数如下: 电容 1 000μF,电压 150~ 500 V 间隔 20 V取值 ;
3. 应用:Cytomix缓冲液(细胞转染)为转染非贴壁细胞和难转染细胞提供了一种较好的解决办法;
4. 本产品经过滤除菌处理,为即用型试剂;
在cytomix缓冲液中电击悬浮细胞能有效穿孔,其平均转染率为1.42%;而且cytomix缓冲液能极大的提高贴壁细胞Vero的转染率,还能有效转染在其它缓冲液中不易转染的半悬浮细胞Sp2/0。这可能是因为cytomix缓冲液的组成与细胞内离子成分非常相似。对比电击缓冲液PBS和完全培养基,cytomix缓冲液中的Ca2+、Mf+浓度低,用EGTA代替常用的EDTA,缓冲液PH值、K+浓度高,Na+浓度非常低,该缓冲液极大的模拟了真核细胞内的离子环境。cytomix中的ATP和谷氨酞胺能阻止穿孔时细胞质成分渗漏,保护细胞膜抗氧化作用,有利于孔洞的重新闭合。